不妊治療 | 谷口病院 医療法人定生会 | 大阪府 泉佐野市の産科・婦人科・内科・小児科「ハイクオリティ・ハートフル」

タイミング法

不妊の検査で明らかな問題が見つからないが夫婦生活を行っても妊娠しない方にはタイミング法をお勧めしています。

排卵日を予測して、それに合わせ夫婦生活を取っていただく方法です。
排卵された卵子が受精する能力を維持できる時間は、排卵後8～12時間までと言われています。その時期を予測するため整理10日目ごろより経膣超音波にて卵胞の大きさを測定、排卵時期に合わせて夫婦生活を取っていただきます。

タイミングには自然周期で行う方法と排卵誘発をした周期の2通りあります。

人工授精

タイミング法を半年から1年試しても妊娠に至らない場合や頸管粘液分泌不全精子数の少ない、運動率が悪いといった方に人工授精をお勧めしています。

排卵日を予測しご主人にマスターベーションで精子を採取していただきます。
採精した精子を洗浄濃縮処理にかけ、元気な精子だけを回収しカテーテルを用いて直接子宮内に注入します。

高度生殖医療（ART）の流れ

排卵誘発

なるべく多くの卵子が採れるように卵巣刺激を行い、複数の卵胞を育てていきます。

採卵

麻酔下で腟壁から細い針を刺して行います。卵胞内の内用液を採取し、その中から卵子を回収します。

精子処理

採卵当日に採取していただいた精液を処理し、動きの良い良好精子を回収します。

体外受精・顕微授精

良好精子数が十分に回収できた場合は体外受精、良好精子数が少ない場合は顕微授精を行い、卵子と精子を出合わせます。

正常受精の確認

採卵日の翌日に正常な受精をしているか（極体と前核が2個ずつ出ているか）を確認します。

培養

正常受精していたものを3～6日間培養庫内で培養します。
培養液を交換する際は胚の状態確認、グレード評価も行います。

胚移植

凍結保存

移植：

初期胚、または胚盤胞まで育った胚を柔らかいチューブを使用して子宮内へ戻します。

凍結：

内膜が薄い、OHSSのリスクが高い場合などは育った胚は凍結保存し、別の周期に移植します。移植に使用しなかった余剰胚も凍結となります。

内膜調整

内膜を胚移植に適した状態にしていきます。

胚融解

移植当日の朝に凍結胚を融解します。

胚移植

融解後、胚が生存していることを確認してから子宮内へ戻します。

採卵

膣壁から細い針を刺して卵胞の内用液（卵胞液）を採取します。
顕微鏡下で確認しながら卵胞液内に浮遊している卵子を探し出して回収します。

卵胞液内の卵子

※採取した直後の卵子は卵丘細胞というたくさんの細胞に覆われています。

精子処理

密度勾配包とスイムアップ法を行い、良好な精子を回収します。

遠心

遠心

重層

静置

体外受精

培養液を入れたシャーレの中に良好精子の濃度が約20万/mlになるように精子を入れ、そこに卵子を2～3個入れて精子の力で受精させます。
約4時間後に卵子についている卵丘細胞を除去し、卵子の成熟具合、受精しているかどうかを確認します。
2個の極体ができるものは受精していると判断します。
体外受精の受精率は70～80％です。

※極体：

余分な染色体を放出する際に形成されるものです。ヒトの染色体は46本なので、卵子と精子はそれぞれ23本の染色体をもつように特殊な分裂（減数分裂）を行って染色体の数を調整します。

※卵子と精子を出合わせる操作を「媒精」と呼びます。

成熟卵(MⅡ)

受精

受精卵

※1個の極体を放出した成熟卵に精子が侵入し、受精すると2個目の極体が放出されます。

未熟卵(MⅠ)

未熟卵(GⅤ)

変性卵

受精

受精卵

※1個の極体を放出した成熟卵に精子が侵入し、受精すると2個目の極体が放出されます。

顕微授精（ICSI）

顕微授精は成熟している卵子にしか行えないので、卵子についている卵丘細胞を除去し、卵子の成熟具合を確認してから行います。
処理しておいた精子の中から形、動きがともに良い精子を選別し、卵子1個につき1匹の精子をインジェクションピペットと呼ばれる細いガラス針を使って卵子の中へ直接注入して受精させます。
顕微授精の受精率は80～90％程度です。

顕微授精はマニピュレーターでインジェクションピペットを操作して行います。

①形態良好な運動精子をインジェクションピペットに吸引します。
②運動精子の不動化
インジェクションピペットで精子尾部をディッシュの底に擦り付け運動を停止させます。

③卵子を固定し、精子をピペットの先端へ移動させます。

④透明体を貫き卵子を刺します。

⑤卵細胞質を適当量吸引し、細胞膜を破ります。
（良好な卵子ほど細胞膜に弾力性があります）

⑥精子を細胞質内に注入します。

正常受精の確認

採卵翌日（体外受精、顕微授精の約18時間後）に正常に受精しているかの確認を行います。
極体と前核がそれぞれ2個ずつ確認できるものを正常受精と判断し、培養を継続します。

※前核：

卵子由来の核と精子由来の核があり、2つが融合して新しい1つの核となります。

成熟卵

精子侵入

精子侵入

第2極体放出

正常受精

写真のように、前核が1個しか確認できない、3個確認できるといった場合は異常受精と判断します。

培養

温度、二酸化炭素濃度などが一定に保たれるインキュベーターと呼ばれる培養庫内で胚を培養していきます。
分裂した細胞は割球と呼び、胚の観察時は割球の数や、どの段階まで育っているのかを確認し、グレード評価も行います。
基本的には胚盤胞と呼ばれる状態になるまで培養してから移植や凍結を行いますが、症例によっては初期胚の状態で行うこともあります。
また、胚は一つ一つ性質が異なっているため、培養したすべての胚が胚盤胞まで育ってくるとは限りません。

グレード評価

【胚盤胞のグレード】

拡張度（胞胚腔の広がり具合）と内部細胞塊、 栄養外胚葉の形態的評価から胚盤胞のグレードを決定します。

グレード表記

5	3	A	A
培養日数	拡張度	内部細胞塊 （ICM）	栄養外胚葉 （TE）

胚移植

柔らかいチューブを使って子宮内に胚を戻します。
症例によって初期胚移植か胚盤胞移植かを選択しますが、基本的には胚盤胞移植が第一選択となります。

【初期胚移植】

採卵から3日目の胚を移植します。
複数回採卵し、培養しても良好な胚盤胞が得られない場合などに行います。

【胚盤胞移植】

胚盤胞に育った胚を移植します。
培養していた胚が胚盤胞まで育たたなかった場合、移植は行えません。
初期胚移植よりも比較的高い妊娠率を期待できます。

アシステッドハンチング（AHA）

透明帯のいちぶをレーザーで削り、細胞が透明帯から脱出しやすくなるように補助する方法です。
透明帯が硬くなっているなど胚盤胞自身の力での脱出が困難と思われる場合に行います。

胚凍結

子宮内膜が薄い、OHSSのリスクが高いなどの理由で採卵周期に胚移植を行えない場合は胚を凍結保存しておきます。また、採卵周期に移植を行っていても移植しなかった余剰胚は凍結保存しておき、2回目以降の移植に使用します。
凍結の際、細胞内に氷の結晶ができると細胞が死んでしまいます。そのため、凍結前に耐凍剤を浸透させてから細胞内の水分を脱水する処理を行い、その後液体窒素内で保存しておきます。
凍結融解後の生存率は90％以上です。

胚融解

凍結保存していた胚を37度に温めておいた融解液に投入して融解します。
凍結時に浸透させた耐凍剤を希釈しながら段階的に除去していき、細胞を凍結前の状態に戻していきます。
3時間ほど回復培養を行い、細胞が生存しているかを確認してから移植します。